ALTERACIONES EN LA REPLICACIÓN DE PACIENTES CON DIABETES

MUTACIONES

Aunque la replicación del ADN es muy precisa, no es perfecta. Muy rara vez se producen errores, y el ADN nuevo contiene uno o más nucleótidos cambiados. Un error de este tipo, que recibe el nombre de mutación, puede tener lugar en cualquier zona del ADN. Si esto se produce en la secuencia de nucleótidos que codifica un polipéptido particular, éste puede presentar un aminoácido cambiado en la cadena polipeptídica. Esta modificación puede alterar seriamente las propiedades de la proteína resultante. Por ejemplo, los polipéptidos que distinguen la hemoglobina normal de la hemoglobina de las células falciformes difieren sólo en un aminoácido. Cuando se produce una mutación durante la formación de los gametos, ésta se transmitirá a las siguientes generaciones.

Alteraciones multifactoriales

En este grupo tampoco existen errores concretos en la información genética, sino una combinación de pequeñas variaciones que en conjunto producen o predisponen al desarrollo del proceso. Algunos de estos procesos son más frecuentes en ciertas familias aunque no demuestran un patrón claro de herencia. Los factores ambientales como la dieta o el estilo de vida pueden también influir en el desarrollo de la enfermedad. Ejemplos de alteraciones multifactoriales son la enfermedad arterial coronaria y la diabetes mellitus.

Diabetes Mellitus

Mutación en los genes:

•IGF2BP2
•CDKAL1
•CDKN2A
•CDKN2B

Familiar
•Genoma
•PDX1
GLUT-2
 Leptina 

Mutaciones en los genes:
PPAR-Y
ATK2
IR

Polimorfismos 
SNP
WNR-minisatélites
ST-microsatélites

Esporadicas
•Hipertensión
•Sobrepeso, Obesidad
•Edad >59 años
•Sexo: > mujeres

•Mutaciones en los genes:
•HNF4α HNF1α IPF-1 HNF1β NEUROD1 PPAR- Y ATK2 IR
•Afectan la síntesis del ARNm y enzima glucocinasa

Bibliografia:

• rincondelvago
• patologiaclinica pdf
• imbiomed
• the medical biochemistry

Link de Interes:
Hallan una molécula que aumenta la replicación de células beta en animales

Articulo de PCR sobre la Diabetes

Heteroplasmia de la mutación del ADN mitocondrial m.3243A>G en la diabetes y sordera de herencia materna

Luis Rodrigo Cataldo, Pablo Olmos, Susan Valerie Smalley, Alberto Díez, Alejandra Parada, Roger Gejman, Ricardo Fadic, José Luis Santos

La diabetes de herencia materna y sordera ( MIDD ) es causada por mutaciones en el ADN mitocondrial (ADNmt ), principalmente m.3243A > G. Su severidad, el comienzo y el fenotipo clínico de los pacientes MIDD se determinan en parte por la proporción de copias mutantes de ADN mitocondrial en cada célula y tejido ( heteroplasmia ) . La identificación de MIDD permite un tratamiento con insulina evitando fármacos que puedan interferir con la cadena mitocondrial. Se estimó el grado de heteroplasmia de la mutación m.3243A > G de la sangre , la saliva, la raíz del pelo y una biopsia muscular mediante PCR cuantitativa (qPCR ) en un paciente adulto femenino. Para ello, se produjo PCR se insertaron en un vector creatina plasmática con 3243A o G. Mutant y vectores de tipo salvaje se mezclaron en diferentes proporciones para crear una curva de calibración se utiliza para interpolar heteroplasmia porcentajes con ciclos de umbral qPCR . Las proporciones de m.3243A > G heteroplasmia eran 62 % (músculo ) , 14 % ( saliva ) , 6 % ( leucocitos de la sangre ) y 3 % en la raíz del pelo . El análisis cuantitativo de heteroplasmia mostró marcadas variaciones en diferentes tejidos (más alto en el músculo y el más bajo en la sangre ) . Dada la relativamente alta heteroplasmia encontrado en la saliva , este tipo de muestra biológica puede representar una manera no invasiva adecuada para evaluar la presencia de mutaciones m.3243A > T en estudios epidemiológicos .

Palabras clave: Sordera ; ADN , mitocondrial ; Las técnicas genéticas .

PDF: http://www.scielo.cl/scielo.php?pid=S0034-98872013000300004&script=sci_arttext

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Objetivo: 

• Evaluar el grado de Heteroplasmia de la mutación m.3243A>G en digerentes tejidos obtenidos de una pacientes afectada con MIDD (sangre, raiz de pelo, musculo y saliva).
• Evaluar su utilidad.

Muestras Biológicas:

1. Saliva no estimulada
2. Raíces de Pelo 
3. Leucocitos de Sangre
4. Biopsia de Tejido Muscular del Antebrazo

Extracción de AN: ADN mitocondrial y Genomico

1. Metodo Oragene Kits
2. Resina Chelex-100
3. y 4. Wizard Genomic ADN Purification Kit; Promega & Cuantificación de ADN: Fluorimétricamente

Gen Amplificado:

gen MT-TL1 (429 pb, 312 pb y 117 pb)

Tipo de PCR:

PCR-RFLP

qPCR

Visualización:

Electrofluorescencia

Pasos de la PCR:

• 95ºC por 10 min
• 92ºC por 25 seg -> 40 ciclos
• 60ºC por 80 seg

Analisis Estadistico:

Eficiencia: 1,8

¿Cómo se diagnostica la Diabetes? Pruebas de Tamizaje y Confirmación

PRUEBAS DE TAMIZAJE

Primeramente debemos conocer que una prueba de tamizaje, también llamada de screening, es un método para identificar en una población sana a individuos que padezcan alguna enfermedad sin presentar síntomas, son menos complejas que las pruebas confirmatorias para la enfermedad. 

Existen 4 pruebas efectivas que se han empleado para el tamizaje de Diabetes Mellitus:

- Glucemia de ayuno.

- Glucemia 2 horas poscarga de glucosa.

- Hemoglobina Glucosilada A1c (HbA1c).

- Glucometría capilarrealizada mediante glucómetro.

La glucemia en ayunas es la prueba más sencilla para el tamizaje oportuno de DM en personas asintomáticas que por algún motivo acuden a un servicio  de salud. Sin embargo, la prueba de oro para el  tamizaje de diabetes en estudios poblacionales  sigue siendo la medición de la glucemia 2 horas post  carga de glucosa (PTOG).

Examen de glucemia

Es un examen que mide la concentración de glucosa en la sangre, podemos tomar como referencia:

Para definir si el resultado es normal o no, se establecieron escalas o umbrales:

Por debajo de los 70 ml/dl: si el valor es inferior a 70, se dice que hay hipoglucemia, es decir, el nivel de glucosa en sangre está por debajo de lo normal.

Entre 70 y 110 ml/dl: si el resultado oscila entre estos dos umbrales, entonces la glicemia del paciente es normal.

Entre 110 y 126 ml/dl: este rango recibe el nombre de “glucosa alterada en ayuno”. Puede considerarse que el paciente está en un estado de prediabetes, y existe cierto riesgo de desarrollar diabetes tipo II.

Por encima de los 126 ml/dl: cuando el resultado indica 126 o más miligramos de glucosa en sangre, entonces el médico puede diagnosticar diabetes.

Prueba de tolerancia a la glucosa (PTOG)

La prueba de tolerancia oral a la glucosa (PTOG) consiste en la medición de la glucemia dos horas después de dar una carga oral de 75 gramos de glucosa.

Para la realización de la PTOG la persona debe ingerir 75 gramos de glucosa diluidos en 300 ml de agua con o sin sabor, a temperatura ambiente, en un período no mayor de cinco minutos. Además debe reunir las
siguientes condiciones:

- Ayuno de ocho a 14 horas (se puede tomar agua)

- Evitar restricciones en la dieta durante los tres días precedentes (consumo mínimo de 150 gramos de hidratos de carbono al día). La evidencia reciente sugiere que es conveniente consumir la noche anterior una comida con un contenido razonable de carbohidratos (30-50 g)

- Evitar cambios en la actividad física habitual durante los tres días precedentes

- Durante la prueba debe mantenerse en reposo y sin  fumar.

- Es preferible que no tenga una infección u otra enfermedad intercurrente. De lo contrario, debe quedar consignada en el informe de la prueba.

- Debe interrumpir el consumo de medicamentos que pudieran alterar los valores de la glucemia mínimo 12 horas previas a la realización de la prueba. De lo contrario, deben quedar consignados en el informe de la prueba

- La PTOG no se debe practicar en pacientes con VIH positivo que estén recibiendo inhibidores de proteasas por el alto número de resultados de glucemia falsamente positivos.

- En niños la PTOG rara vez se utiliza, pero cuando se requiere la carga de glucosa se calcula con base en 1.75 g por kg de peso sin exceder 75 g en total.  

PRUEBAS CONFIRMATORIAS

Mediante las pruebas confirmatorias podemos determinar que efectivamente, se padece de la enfermedad, y a partir de este resultado se deben tomar las medidas necesarias para atenuar la patología y evitar posibles complicaciones.

• Determinación de glucosa en sangre
• Diagnostico de hemoglobina glicosilada (Hba1c)
• Determinacion de anticuerpo por metodo de ELISA

Hemoglobina glicosilada (HbA1c) 

Es un examen de laboratorio que muestra la cantidad promedio de glucosa en la sangre durante los últimos tres meses, esto es de mucha utilidad para el control de la enfermedad.
Los glóbulos rojos que circulan en la sangre contienen una proteína llamada hemoglobina. La glucosa, que también circula en la sangre, tiene dentro de sus características el poder adherirse a la hemoglobina del glóbulo rojo y así se queda con él durante su promedio de vida, que es de más o menos 90 a 120 días.

Entonces lo que hace el examen de hemoglobina glicosilada es justamente medir la cantidad de glucosa adherida a los glóbulos rojos. El resultado se expresa en un porcentaje (%) que finalmente indica el nivel promedio de glicemias durante el trimestre anterior a la prueba.

Los siguientes son los resultados cuando el HbA1c se están usando para diagnosticar diabetes:

• Normal: menos de 5.7 %
• Prediabetes: 5.7 a 6.4%
• Diabetes: 6.5% o superior

Referencias:

http://apuntesmedicos.net/2008/05/27/diagnostico-de-la-diabetes-mellitus-y-otros-problemas-metabolicos-asociados-a-regulacion-alterada-de-la-glucosa/

http://www.idf.org/webdata/docs/GGTD%20ES%2001%20Tamizaje%20y%20diagnostico.pdf

http://www.nav-nnn.com/diabetes-diagnostico-a03622109.htm

http://www.galenusrevista.com/Nuevas-guias-para-el-diagnostico.html

Información básica de la diabetes

"La diabetes es un grupo de enfermedades caracterizadas por un alto nivel de glucosa resultado de defectos en la capacidad del cuerpo para producir o usar insulina." 

¿QUÉ ES?

La diabetes es una enfermedad crónica que aparece debido a que el páncreas no fabrica la cantidad de insulina que el cuerpo humano necesita, o bien la fabrica de una calidad inferior. La insulina, una hormona producida por el páncreas, es la principal sustancia responsable del mantenimiento de los valores adecuados de azúcar en sangre. Permite que la glucosa sea transportada al interior de las células, de modo que éstas produzcan energía o almacenen la glucosa hasta que su utilización sea necesaria. Cuando falla, origina un aumento excesivo del azúcar que contiene la sangre (hiperglucemia). De hecho, el nombre científico de la enfermedad es diabetes mellitus, que significa "miel".

A la glucosa que circula por la sangre se le llama glucemia
Valores bajos de glucosa en la sangre	Valores normales de glucosa en sangre	Valores anormalmente altos de glucosa en sangre
Hipoglucemia En general, se empiezan a sentir síntomas de falta de glucosa cuando el nivel de glucemia está en 55mg/dl o menos.	Normoglucemia En ayunas, entre 70 y 100 mg/dl. El nivel de glucemia después del ayuno nocturno se llama Glucosa Basal.	Hiperglucemia Superior a 100 mg/dl en ayunas.
La dificultad del organismo para regular la normoglucemia puede responder a varias causas.  La diabetes es una enfermedad crónica y, hoy por hoy, incurable.		Si usted no tiene diabetes y en una determinación ocasional de glucemia se encuentra a 100mg/dl, o más, consulte a su médico. Probablemente le recomendará una segunda determinación

•  El diagnostico de diabetes sólo lo puede confirmar un médico
•  Es importante orientar los esfuerzos a mantener los niveles de glucemia lo más cercanos a la     normalidad posible y de manera sostenida.

CAUSAS

La diabetes afecta al 6% de la población. Las posibilidades de contraerla aumentan a medida que una persona se hace mayor, de modo que por encima de los setenta años la padece alrededor del 15% de las personas. Es esencial educar a los pacientes para que controlen su diabetes de forma adecuada, ya que puede acarrear otras enfermedades tanto o más importantes que la propia diabetes: enfermedades cardiovasculares,

neurológicas, retinopatía (afección ocular que puede conducir a la ceguera) o nefropatía (enfermedad del riñón). 

El momento de aparición de la enfermedad, así como las causas y síntomas que presentan los pacientes, dependen del tipo de diabetes de que se trate.

CLasificacion

• Hay 3 tipos principales de diabetes: diabetes mellitus tipo 1, tipo 2 y gestacional
• Las personas con diabetes tipo 1 mueren si no tienen insulina
• Las personas con diabetes tipo 2 pueden pasar muchos años sin diagnosticar
• Una diabetes mal controlada causa graves complicaciones y muerte prematura
• 
  
• Diabetes tipo 1. Las edades más frecuentes en las que aparece son la infancia, la adolescencia y los primeros años de la vida adulta. Acostumbra a presentarse de forma brusca, y muchas veces independientemente de que existan antecedentes familiares. Se debe a la destrucción progresiva de las células del páncreas, que son las que producen insulina. Ésta tiene que administrarse artificialmente desde el principio de la enfermedad. Sus síntomas particulares son el aumento de la necesidad de beber y de la cantidad de orina, la sensación de cansancio y la pérdida de peso.
• Diabetes tipo 2. Se presenta generalmente en edades más avanzadas y es unas diez veces mas frecuente que la anterior. Por regla general, se da la circunstancia de que también la sufren o la han sufrido otras personas de la familia. Se origina debido a una producción de insulina escasa, junto con el aprovechamiento insuficiente de dicha sustancia por parte de la célula. Según qué defecto de los dos predomine, al paciente se le habrá de tratar con pastillas antidiabéticas o con insulina (o con una combinación de ambas). No acostumbra a presentar ningún tipo de molestia ni síntoma específico, por lo que puede pasar desapercibida para la persona afectada durante mucho tiempo.
• Diabetes gestacional. Se considera una diabetes ocasional. Se puede controlar igual que los otros tipos de diabetes. Durante el embarazo la insulina aumenta para incrementar las reservas de energía. A veces, este aumento no se produce y puede originar una diabetes por embarazo. Tampoco tiene síntomas y la detección se realiza casi siempre tras el análisis rutinario a que se someten todas las embarazadas a partir de las 24 semanas de gestación.
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• "Para un control eficaz de la diabetes se necesita la colaboración entre la persona con diabetes y los profesionales sanitarios"

Bibliografía & Netgrafia

• http://www.diabetes.org/es/informacion-basica-de-la-diabetes/?loc=db-es-slabnav#sthash.9ij9rIuT.dpuf
• https://www.fundaciondiabetes.org/diabetes/box01.htm
• http://www.dmedicina.com/enfermedades/digestivas/diabetes
• http://www.idf.org/diabetesatlas/5e/es/que-es-la-diabetes